無外泌體血清的制備步驟及注意事項

更新時間：2021-08-11　點擊量：2931

　　無外泌體血清是一種可由多種細胞分泌的直徑為30-150nm的膜性小囊泡。經(jīng)研究后發(fā)現(xiàn)，其內含有*的蛋白質與核酸分子，所含成份與其細胞來源密切相關，這也決定了無外泌體血清的功能特異性，如抗原提呈、信號傳導或誘導抗腫瘤免疫反應、細胞遷移、細胞分化、細胞間通信、腫瘤轉移等。目前，無外泌體血清研究已經(jīng)成為臨床診斷與基礎醫(yī)生的新熱點。

　　無外泌體血清制備步驟：

　　1. 根據(jù)需要處理的血清體積選擇合適的轉子與超離管。

　　2. 在超凈工作臺，將普通血清置于超離管中，配平后，進行熱封口。

　　3. 將封口后的超離管放于離心機轉子中，并加入相應適配器然后擰緊轉頭蓋。

　　4. 設置離心程序：4℃，120,000 ×g，離心18小時（也有研究者選擇100,000 ×g離心18小時）。

　　5. 離心結束后，回收上清液，為避免污染，在超凈工作臺操作。

　　6. 收集得到無外泌體血清，并儲存于-20℃中備用。

　　注意事項請注意了：

　　1：離心后，血清外泌體會富集在管底和管壁；

　　2：吸取血清時，只吸取澄清部分的血清，并且遠離上圖中標記的區(qū)域；

　　3：吸取70-80%的澄清的血清；（注意：動作慢，動作輕）

　　4：其余的渾濁血清留作正常細胞的的營養(yǎng)物添加使用，避免浪費。