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緩沖液的配制方法和保存方法介紹

更新時(shí)間:2020-12-24 點(diǎn)擊量:1877
   PBS是磷酸緩沖鹽溶液(phosphate buffer saline),一般作為溶劑,起溶解保護(hù)試劑的作用。它是生物化學(xué)研究中使用較為廣泛的一種緩沖液,主要成分為Na2HPO4、KH2PO4、NaCl和KCl,由于Na2HPO4和KH2PO4有二級(jí)解離,緩沖的pH值范圍很廣,而NaCl和KCl主要作用為增加鹽離子濃度。如有需要PBS還可以補(bǔ)加1 mmol/L CaCl2和0.5 mmol/L MgCl2,以提供二價(jià)陽(yáng)離子。
  緩沖液配制方法:
  含0.05%吐溫-20的pH7.4的磷酸鹽緩沖液(簡(jiǎn)稱為PBS-T)配制方法為:
  稱取磷酸二氫鉀(KH2PO4),磷酸氫二鈉(Na2HPO4·2H2O),氯化鈉(NaCl),氯化鉀(KCl),吐溫-20 ,加水。
  PBS:Phosphate Buffered Saline
  PBS 1L配方pH7.4:
  磷酸二氫鉀(KH2PO4):0.24g,
  磷酸氫二鈉(Na2HPO4):1.44g,
  氯化鈉(NaCl):8g,
  氯化鉀(KCl):0.2g,
  加去離子水約800mL充分?jǐn)嚢枞芙?,然后加入濃鹽酸調(diào)pH至7.4,后定容到1L
  保存方法:
  加去離子水約800mL充分?jǐn)嚢枞芙?,然后加入濃鹽酸調(diào)pH至7.4,后定容到1L。高溫高壓滅菌后置于4攝氏度冰箱保存待用。
  PBS緩沖液(pH7.2~7.4):
  KH2PO42mM
  Na2HPO4 8mM
  NaCl 136mM
  KCL 2.6mM
  PBS緩沖液一般作為溶劑,起溶解保護(hù)試劑的作用,具體試劑一般也有不同的比例配方,在針對(duì)性上就有了更好的效果。
  1x PBS緩沖液就是0.01M的磷酸鹽緩沖液,可直接使用。2x PBS就是2倍濃度,使用時(shí)稀釋一倍使用。0.1M的PBS一般不用來(lái)配置緩沖液,用于其它用處。
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